高山红景天提取物对糖尿病大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量的影响

amy54321 · 发表于 2014-8-19 16:40:46

   作者：崔雄朴锦花刘宇全信福

【摘要】  目的观察高山红景天提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPx）活性及丙二醛（malodialdehyde，MDA）含量的影响。方法采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型，分别测定各组大鼠使用高山红景天提取物处理前后大鼠肝组织中GSH-Px活性和MDA含量。结果高山红景天提取物可提高糖尿病大鼠肝组织中的GSH-Px活性，降低MDA含量。结论高山红景天提取物对糖尿病大鼠具有清除自由基及抗脂质过氧化作用。

【关键词】  红景天提取物糖尿病谷胱甘肽过氧化物酶丙二醛抗氧化作用

　Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Rhodiola sachalinsis A. Bor aqueous extract (RSE) on the activity of GSHPx and the content of MDA in streptozotocin(STZ)induced diabetic rats. MethodsThe diabetic model of rat was induced by STZ. The activity of GSHPx and the content of MDA were measured before and after treatment with RSE.ResultsRSE increased the hepatic GSHPx activity and decreased the content of MDA. ConclusionRSE can clear the free radicals and has the effect of anti-lipid peroxidation.

　　Key words：Rhodiola sachalinensis; Diabetes; Glutathione peroxidase; Malondialdehyde; Antioxidation

　　高山红景天Rhodiola sachalinensis A. Bor是景天科红景天属植物，为多年生草本植物，其根茎入药，民间常用于清肺止咳、止血、跌打损伤、烧烫伤、阳痿及糖尿病等病症。我国红景天种类多，野生资源丰富，有七十余种，主产于东北、华北、西南、西北和华中等地。红景天的现代研究证明具有增强记忆、改善心脑血管系统功能、增强免疫、抗疲劳、耐缺氧、抗肿瘤、抗病毒、抗微波辐射、保护器官免受自由基损伤和降血糖等多方面药理作用［1，2］。本实验通过观察高山红景天对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝组织GSHPx活性及MDA含量的影响，为进一步阐明红景天的降低血糖作用机制提供实验依据。

　　1  材料与方法

　　1.1 材料高山红景天R.sachalinensis采自吉林省长白山，经延边大学药学院吕惠子副教授鉴定。称取1 kg高山红景天切碎后，用蒸馏水回流提取3次，4 h/次，温度100℃，合并3次滤液，减压浓缩，得高山红景天浸膏150 g。

　　1.2 试剂与仪器链脲佐菌素(STZ)为Sigma公司的产品；GSHPx和MDA试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。其他试剂均为国产分析纯。使用的仪器有小型离心机 (Sigma 113)，紫外分光光度计（SHIMADZU UV1201）和生化分析仪(SPOTCHEME 2, SP4430)等。

　　1.3 方法

　　1.3.1  链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型的制作实验采用成年SD种雄性大鼠，适应性地喂养4 d后，禁食24 h，自由饮水。将链脲佐菌素用柠檬酸缓冲液配制成 5.5 g/L注射液，给每只大鼠以55 mg/kg的剂量肌肉注射，注射后第5天测定空腹血糖，空腹血糖≥8.9 mmol/L，确认为糖尿病大鼠。

　　1.3.2  动物分组及处理将20只糖尿病模型大鼠随机分为两组，即模型对照组(STZ)和200 mg/kg剂量给药组(STZ + RSE)，每组各10只。另取20只正常大鼠随机分为两组，即正常对照组(control)和200 mg/kg剂量给药对照组(RSE)。实验期间各组大鼠均给予块料喂养，200 mg/kg剂量给药组大鼠每天分别腹腔注射高山红景天提取物7 d；模型对照组及正常对照组大鼠每日腹腔注射相应体积的生理盐水7 d。

　　1.3.3  生物化学检测实验前后给实验动物分别禁食12 h，取眼眶静脉窦血，分离血清后，取新鲜肝组织称重，用冰冷的生理盐水漂洗后，按1∶10(w/V)加入预冷的生理盐水，置玻璃匀浆器内冰浴下匀浆备用。应用GSH-Px和MDA试剂盒分别测定各组大鼠肝组织GSHPx活性及MDA含量。    作者：崔雄朴锦花刘宇全信福

【摘要】  目的观察高山红景天提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPx）活性及丙二醛（malodialdehyde，MDA）含量的影响。方法采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型，分别测定各组大鼠使用高山红景天提取物处理前后大鼠肝组织中GSH-Px活性和MDA含量。结果高山红景天提取物可提高糖尿病大鼠肝组织中的GSH-Px活性，降低MDA含量。结论高山红景天提取物对糖尿病大鼠具有清除自由基及抗脂质过氧化作用。

【关键词】  红景天提取物糖尿病谷胱甘肽过氧化物酶丙二醛抗氧化作用

　Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Rhodiola sachalinsis A. Bor aqueous extract (RSE) on the activity of GSHPx and the content of MDA in streptozotocin(STZ)induced diabetic rats. MethodsThe diabetic model of rat was induced by STZ. The activity of GSHPx and the content of MDA were measured before and after treatment with RSE.ResultsRSE increased the hepatic GSHPx activity and decreased the content of MDA. ConclusionRSE can clear the free radicals and has the effect of anti-lipid peroxidation.

　　Key words：Rhodiola sachalinensis; Diabetes; Glutathione peroxidase; Malondialdehyde; Antioxidation

　　高山红景天Rhodiola sachalinensis A. Bor是景天科红景天属植物，为多年生草本植物，其根茎入药，民间常用于清肺止咳、止血、跌打损伤、烧烫伤、阳痿及糖尿病等病症。我国红景天种类多，野生资源丰富，有七十余种，主产于东北、华北、西南、西北和华中等地。红景天的现代研究证明具有增强记忆、改善心脑血管系统功能、增强免疫、抗疲劳、耐缺氧、抗肿瘤、抗病毒、抗微波辐射、保护器官免受自由基损伤和降血糖等多方面药理作用［1，2］。本实验通过观察高山红景天对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝组织GSHPx活性及MDA含量的影响，为进一步阐明红景天的降低血糖作用机制提供实验依据。

　　1  材料与方法

　　1.1 材料高山红景天R.sachalinensis采自吉林省长白山，经延边大学药学院吕惠子副教授鉴定。称取1 kg高山红景天切碎后，用蒸馏水回流提取3次，4 h/次，温度100℃，合并3次滤液，减压浓缩，得高山红景天浸膏150 g。

　　1.2 试剂与仪器链脲佐菌素(STZ)为Sigma公司的产品；GSHPx和MDA试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。其他试剂均为国产分析纯。使用的仪器有小型离心机 (Sigma 113)，紫外分光光度计（SHIMADZU UV1201）和生化分析仪(SPOTCHEME 2, SP4430)等。

　　1.3 方法

　　1.3.1  链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型的制作实验采用成年SD种雄性大鼠，适应性地喂养4 d后，禁食24 h，自由饮水。将链脲佐菌素用柠檬酸缓冲液配制成 5.5 g/L注射液，给每只大鼠以55 mg/kg的剂量肌肉注射，注射后第5天测定空腹血糖，空腹血糖≥8.9 mmol/L，确认为糖尿病大鼠。

　　1.3.2  动物分组及处理将20只糖尿病模型大鼠随机分为两组，即模型对照组(STZ)和200 mg/kg剂量给药组(STZ + RSE)，每组各10只。另取20只正常大鼠随机分为两组，即正常对照组(control)和200 mg/kg剂量给药对照组(RSE)。实验期间各组大鼠均给予块料喂养，200 mg/kg剂量给药组大鼠每天分别腹腔注射高山红景天提取物7 d；模型对照组及正常对照组大鼠每日腹腔注射相应体积的生理盐水7 d。

　　1.3.3  生物化学检测实验前后给实验动物分别禁食12 h，取眼眶静脉窦血，分离血清后，取新鲜肝组织称重，用冰冷的生理盐水漂洗后，按1∶10(w/V)加入预冷的生理盐水，置玻璃匀浆器内冰浴下匀浆备用。应用GSH-Px和MDA试剂盒分别测定各组大鼠肝组织GSHPx活性及MDA含量。　　1.3.4 统计学处理数据以±s标准差表示，各组样本均数间差别的假设检验用方差分析(ANOVA),P＜0.05认为有统计学意义。

　　2  结果

　　在高山红景天提取物剂量为200 mg/kg时具有降低糖尿病大鼠空腹血糖的作用，所以在实验中只测试了高山红景天提取物对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠肝组织的GSH-Px活性及MDA含量的影响。由表1可见，高山红景天提取物200 mg/kg剂量给药组(STZ+RSE)大鼠肝组织的GSH-Px活性及MDA含量与模型对照组(STZ)比较均有显著性差异(P＜0.01)。

　　表1  高山红景天提取物对糖尿病大鼠肝组织GSH-Px活性及MDA含量的影响（略）

　　与正常对照组比较，**P< 0.01; 与模型对照组比较，##P< 0.01

　　3  讨论

　　自由基可引发多价不饱和脂肪酸过氧化而生成过氧化脂质(LPO)，其最终产物MDA可使蛋白质、核酸及脂类发生交联，致生物膜发生变性，细胞突变、衰老或死亡。它产生的量与氧自由基的量相平行，亦与脂质过氧化的程度相平行，故检测MDA可反映氧自由基的水平及脂质过氧化的程度［3］。GSH-Px是机体一种抗氧化的重要酶，它能催化还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂质氢过氧化物(ROOH)成羟基化合物(ROH)，使对机体有毒害的ROOH变成对机体无害的ROH，从而防止了ROOH对细胞和亚细胞膜系统的破坏作用，保持了生物膜系统的完整性。GSH-Px还能催化GSH还原H2O2。H2O2对人体有剧毒，它能氧化巯基，使某些含巯基的酶和活性依赖于巯基的生物活性物质失去活性，又能氧化多烯脂肪酸而使生物膜受损。在GSH-Px存在下，H2O2被GSH还原成H2O从而保护生物膜不受氧化损害［4］。链脲佐菌素通过产生自由基OH，致使脂质过氧化不仅直接损伤胰腺，破坏胰岛细胞，降低体内胰岛素水平，使血糖升高，而且还可累及其它脏器(如肝脏)，可使肝脏的糖原合成及葡萄糖利用受抑制，从而进一步加重血糖的升高，本实验结果显示，治疗前糖尿病大鼠肝组织MDA含量明显高于正常，GSH-Px活性明显低于正常，提示此时糖尿病大鼠体内自由基含量增多，脂质过氧化作用增强，且GSH-Px活性降低；经治疗后，200 mg/kg剂量给药组大鼠肝组织GSH-Px活性明显提高，而MDA的含量明显减少，均与模型对照组相比较有显著性差异，提示高山红景天提取物可提高肝组织GSH-Px活性，清除氧自由基，抑制脂质过氧化进程。

【参考文献】
  　　［1］王家明，闫继平，王盛虔．红景天的药理作用研究进展［J］.中医药学报，2003，31 (4)：57.

　　［2］程秀娟，吴岩，赵全成，等．高山红景天多糖降血糖作用［J］.中国中药杂志，1993，l8 (9)：557.

　　［3］蔡英兰，李相五，金香子．榛花对糖尿病大鼠血清SOD活性及MDA含量的影响［J］.延边大学医学学报，2005，28 (4)：251．

　　［4］谭峰，刘群良，张月娟，等．还少丹对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量影响的研究［J］.中医药导报，2006，12 (7)：1．

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