复方鱼腥草口服液提取工艺研究

光醉泪

【摘要】  　　目的研究复方鱼腥草口服液的提取工艺。方法含有挥发油类成分的药材采用水蒸气蒸馏法进行提取；水溶性成分煎煮提取，采用正交实验法进行优选，薄层-紫外分光光度法进行含量测定。结果挥发油提取最佳工艺：10倍量水，温浸0.5 h，水蒸气蒸馏提取4 h；水溶性成分提取最佳工艺：10倍量水，煎煮两次，2 h/次。结论该方法简便可行，可作为复方鱼腥草口服液的提取工艺。

【关键词】  复方鱼腥草口服液； 提取工艺； 正交实验； 薄层-紫外分光光度法

　　Abstract：ObjectiveTo research the extraction process of the Compound Houttuynia Oral Liquid. MethodsVolatile oils which are active ingredients of the medicinal materials were extracted by steam distillation method; water-soluble components which are active ingredients were extracted by boiling methods, optimized  by orthogonal test and determined by TLC - UV spectrophotometry.ResultsThe optimum technological conditions for extracting volatile oil were as follows:the ratio of water to sample was 10:1,the time of warm-infusion was 0.5R,Steam distillation time was 4 h;the water soluble constituents were extracted with water(10 times of the materials) for 2 times,two hours each time.ConclusionThe method is simple and feasible, can be used as the extraction process of the Compound Houttuynia Oral Liquid.

　　Key words：Co-Herba Houttuyniae Oral Liquid；  Extraction process；  UV pho tometer method；  Orthogonal design
   
　　复方鱼腥草口服液是由复方鱼腥草片改剂型而来。其处方由鱼腥草、板蓝根、连翘、黄芩、金银花组成，用于治疗咽喉红肿，咽痛，急性咽炎，急性扁桃体炎［1］。本实验对复方鱼腥草口服液的提取工艺进行了研究，采用水蒸气蒸馏法提取处方中所含挥发油类成分，采用水煎煮法提取处方中水溶性成分。并用正交实验法对水溶性成分的提取工艺进行了优选。现报道如下。

　　1  材料与试剂

　　1.1  药材及试剂黄芩、板蓝根、鱼腥草、金银花、连翘，均购自贵阳市药材批发市场；黄芩苷对照品，购自中检所，批号110715-200514；5 mm×10 mm青岛海洋硅胶G板、10 mm×10 mm青岛海洋硅胶G板。所用试剂均为分析纯。

　　1.2  仪器与设备挥发油提取装置，R2-201型旋转蒸发仪（上海中科机械研究所）；755B型紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司分析仪器总厂）；R2-201型旋转蒸发仪（上海中科机械研究所）；SB2200型超声波提取器［必能信超声（上海）有限公司］。

　　2  方法与结果

　　2.1  挥发油提取工艺研究对处方中鱼腥草、金银花、连翘3味药材的主要有效成分——挥发油类成分的提取条件进行研究。

　　2.1.1  挥发油提取方法的确立鱼腥草、金银花、连翘主要有效成分为挥发油类成分，且密度都小于1，所以本实验采用水蒸气蒸馏法对挥发油进行提取。

　　2.1.2  实验操作取处方量药材，适当粉碎，过筛，置于挥发油提取装置中，加10倍量水，温浸0.5 h后，水蒸气蒸馏，馏出液用乙醚萃取，萃取液加无水亚硫酸钠干燥24 h后过滤，滤液用旋转蒸发仪挥去乙醚，收集挥发油，挥发油呈现淡黄绿色。

　　2.1.3  结果与分析采用以上方法蒸馏时间分别为1，2，3，4，5 h，以所得挥发油的量及加鱼腥草素和品红亚硫酸反应后呈现淡紫色的理化鉴别实验［2］作为分析依据。结果见表1。
   
　　由表1数据可以看出，挥发油提取3 h，即可提取出挥发油总量的95%，而反应4 h基本可以提取完毕，且理化鉴别也显示为阴性。所以挥发油的提取工艺定为：加10倍量水，温浸30 min，水蒸气蒸馏提取4 h。

　　2.2  水溶性成分的提取工艺研究

　　2.2.1  水溶性成分的提取方法的确立黄芩的主要成分黄芩苷及板蓝根的主要成分靛蓝、靛玉红均为水溶性成分，适宜采用水煎煮法进行提取。为了对提取工艺条件进行优选，本实验采用正交实验法进行提取研究。　表1  挥发油提取及理化鉴别（略）

　　+：阳性；-：阴性

　　2.2.2  因素水平的确定水溶性成分提取过程中的影响因素主要有加水量（A）、提取时间（B）及提取次数（C）。其因素水平见表2。

　　表2  因素水平表（略）

　　2.2.3  正交实验根据以上因素和水平，按正交设计表L9(34)进行正交实验，以黄芩苷含量未评价指标，选取最佳的水溶性成分提取工艺条件。

　　2.2.4  含量测定
   
　　供试品溶液的预处理：将正交实验所得提取液适当浓缩，取一定量的浓缩液分别加入0，0.25，0.5，0.75，1.0，1.25，1.5倍的无水乙醇，搅拌均匀，静置12个 h，抽滤，晾干称重，得出沉淀物的质量。绘制醇沉曲线，见图1。

　　图1  水提醇沉图（略）
   
　　实验中加入0.75倍的乙醇即可使得提取液澄清透明，从图1中也可看出当加入0.75倍的乙醇时沉淀物质量达到最大值，说明此时已基本上沉淀完全。为了确保沉淀完全，实验中加入0.8倍的无水乙醇。
   
　　澄清的提取液即可进行黄芩苷含量测定。
   
　　黄芩苷标准曲线的绘制：配制浓度为0.05 mg/ml的黄芩苷甲醇对照品溶液在紫外分光光度计上进行扫描，由扫描结果可知，在274 nm处有最大吸收峰。见图2。
   
　　分别配置浓度为0.01，0.02，0.03，0.04，0.05 mg/ml的黄芩苷标准品甲醇溶液在274 nm处测定吸光度，并绘制标准曲线。对所绘制的标准曲线进行线性回归，其回归方程为：
   
　　Y = 61.009X - 0.018 7
   
　　该回归方程的r= 0.999 9，线性良好，可作为标准曲线使用。

　　2.2.5  供试品溶液的制备及黄芩苷含量测定取制得的口服液25 ml，低温蒸干，加甲醇适量，超声处理5 min，滤过甲醇定容至25 ml，取200 μl点于10 mm×10 mm的硅胶G板上，用醋酸丁酯∶甲酸∶水=14∶5∶5展开，将黄芩苷对应部分刮下，加甲醇适量超声处理5 min，滤过，配成10 ml溶液［3，4］。测定其吸光度，由标准曲线可得对应的黄芩苷含量。结果见表3。

　　图2  对照品UV扫描图（略）

　　表3  实验结果（略）

　　方差分析表明，加水量（A）为次要因素，对实验结果影响不大，提取次数（C）和煎煮时间（B）对实验影响较大，最好的水平为A2B3C3。但从实际生产出发，提取3次，2 h/次耗能太大，所以选择加水10倍量，煎煮2次，2 h/次，即选择A2B3C2为最佳提取工艺。

　　3  讨论
   
　　实验中水提取部分加入乙醇沉淀下来的胶体类成分不溶于水，不溶于醇，经检验也不含有实验中的有效成分，故为杂质类成分将其除去。
   
　　本实验中采用的薄层-紫外分光光度法测定黄芩苷的含量，操作简便，仪器便宜，方法准确可靠。
   
　　挥发油类成分最佳提取工艺条件为：加10倍量水，浸泡30 min，提取4 h；水溶性成分最佳提取工艺条件为：取处方量药材加水10倍量水，煎煮2次，2 h/次。

【参考文献】
  　　［1］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：532.

　　［2］ 廖斌明.复方鱼腥草糖浆的制备与质量控制［J］.广西中医学院学报，2003，6（4）：52.

　　［3］ 杨伟峰，藤 彦.复方鱼腥草口服液质控项目研究［J］.中国现代应用药学杂志，2000，17（5）：385.

　　［4］ 罗 璇，李小芩，杨岳隆，等.复方鱼腥草软胶囊的鉴别和含量测定方法研究［J］.中国中药杂志，2004，29（7）：702.