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作者：黄勇其， 耿晓照， 叶世芸， 莫艳珠，吴琨，武孔云
【摘要】 目的比较黔产毛郁金根茎水提取物(AE-A)与姜黄根茎水提取物(AE-L)的抗炎、镇痛作用及急性毒性。 方法采用经典的抗炎、镇痛实验及LD50测定法。 结果AE-A，AE-L均能明显抑制小鼠二甲苯致耳廓肿胀及棉球肉芽肿增生，AE-A作用稍强，且ig给药4 d对幼龄小鼠免疫器官指数均没有明显影响；AE-A ，AE-L均能明显抑制小鼠扭体反应，其作用强度相似。AE-A，AE-L分别以2 g/kg（相当于毛郁金干燥原生药58.8 g/kg，姜黄干燥原生药62.5 g/kg）给小鼠24h ig 3次,观察7 d,小鼠全部存活；以ip给药，小鼠LD50分别为：1.84 g/kg（相当于毛郁金干燥原生药54.24 g/kg±6.27g/kg）和1.82 g/kg（相当于姜黄干燥原生药56.88 g/kg±6.51 g/kg）。结论毛郁金抗炎作用较姜黄稍强，镇痛作用相似，毛郁金的急性毒性与姜黄相似。实验结果为毛郁金的利用提供了一定的药理学基础。
【关键词】 毛郁金； 姜黄； 抗炎； 镇痛； 急性毒性
Abstract:ObjectiveTo compare the anti-inflammatory, analgesic effects and the acute toxicity of the aqueous extract of rhizome of Curcuma aromatica (AE-A) and the aqueous extract of rhizome of C. longn (AE-L) from Guizhou.MethodsTo apply classical experimental methods of anti-inflammatory, analgesic test and LD50 test.ResultsAE-A and AE-L had obvious inhibitory effects on xylene-induced auricle edema and cotton pellet-induced granuloma formation of mice, and the effect on anti-inflammation of AE-A was a little bit stronger than that of AE-L. AE-A andAE-L had no obvious effect on index of younger mice's immune organs by ig for 4 days. AE-A and AE-L could obviously decrease the numbers of writhes of mice caused by ip of acetic acid, and their effect was similar. The mice were given by ig at 2g/kg of AE-A and AE-L (be equal to 58.8g/kg of dried herbs of C. aromatica and 62.5 g/kg of dried herbs of C. longn), three times in 24h, and no dead mouse was found after 7 days of observation. The LD50 of AE-A and AE-L were 1.84 g/kg (be equal to 54.24±6.27g/kg of dried herbs of C. aromatica ) and 1.82 g/kg (be equal to 56.88±6.51 g/kg of dried herbs of C. longn) by ip. ConclusionThe anti-inflammatory effect of C. aromatica is slightly stronger than that of C. longn. The effect on analgesic and the acute toxicity of C. aromatica is almost as strong as that of C. longn. The experimental results can provide a pharmacological basis for the use of C. aromatica.
Key words:Curcuma aromatica; C. longn; Anti-inflammation; Analgesia; Acute Toxicity
贵州姜黄药材品种来源主要为姜科姜黄属姜黄Curcuma longn L，主产于南、北盘江低热河谷地区，是贵州中药资源重点品种之一，历来为国内市场供应大量的商品药材［1，2］。但部分地区亦以姜科姜黄属毛郁金 C. aromatica Salisb. 的根茎收购入药作姜黄用，主治胸胁刺痛、风湿肩背疼痛、跌扑肿痛等［3］，临床应用疗效良好，然而目前此应用法尚缺乏药理实验依据。为了进一步比较贵州姜黄药典品种与地区习用品种的品质，更好地开发利用贵州丰富的姜黄属药用资源，课题组就上述主治功效着重对贵州南、北盘江低热河谷所产的毛郁金根茎的水提取物（AE-A）的抗炎、镇痛作用及急性毒性与同一产地、同时采收的姜黄根茎的水提取物（AE-L）进行比较研究。现将结果报道如下。
1 材料
1.1 药材及其提取物药材为9月份于贵州省兴义市巴结区采集的毛郁金及姜黄的根茎，经贵阳中医学院中药系药用植物教研室何顺志研究员鉴定为Curcuma aromatica Salisb.和C. longn L.。水提取物的制备：分别取两种药材粗粉适量,60℃烘干至恒重，准确称量，水煎煮3次，煎液过滤，滤液冰箱静置过夜, 离心，离心液浓缩，浓缩液以60%乙醇沉淀，离心，离心液挥干乙醇,抽真空干燥制成干浸膏（毛郁金提取收率为3.4%,姜黄提取收率为3.2%），临用时配制成一定浓度的水溶液供试。实验给药剂量按干燥原生药量计算。
1.2 动物昆明种小鼠，清洁级，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（黔）2002－0001。
2 方法［4］与结果
2.1 对小鼠炎症反应的影响
2.1.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及免疫器官指数的影响取雄性小鼠,14～16 g，随机分为5组，每组10只，各组按表1中的剂量以NS或相应试药分别依10 ml/kg ig, 2次/d,连续4 d, 第5天给药1次后称体重，于末次给药后1 h,于各鼠右耳两面涂二甲苯0.05 ml/只,45 min后处死,按文献方法操作,以7 mm打孔器冲下的左、右耳片重量差值为耳肿胀值,并以小鼠脾脏、胸腺重量分别与其体重的比值为免疫器官指数。结果见表1。AE-A，AE-L大剂量和小剂量均能明显抑制耳肿胀，且从耳肿胀抑制率上看，AE-A较AE-L作用稍强；AE-A，AE-L给药4 d对免疫器官指数均没有明显影响。表1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及免疫器官指数影响 (略)
2.1.2 对小鼠棉球肉芽肿增生的影响取雄性小鼠,25～30 g,麻醉后, 于左、右侧腋窝皮下分别植入精密称定的10 mg消毒棉球。待小鼠苏醒后，选活动正常的模型小鼠随机分为3组,各组按表2中的剂量以NS或相应试药分别依10 ml/kg ig，1次/d，连续8d（给药期间，伤口被抓破棉球脱出的样本弃去），于第9天将小鼠处死，剥离肉芽肿,50℃烘干至恒重。以各鼠的左右干燥棉球肉芽肿重量平均值表示对肉芽肿增生的影响。结果见表2。AE-A，AE-L均能明显抑制小鼠棉球肉芽肿增生，且从增生抑制率上看，AE-A较AE-L作用稍强。表2 对小鼠棉球肉芽肿增生的影响(略) 2.2 对醋酸致小鼠扭体反应的影响取小鼠,雌雄各半,18～22 g,随机分为5组, 每组10只，按表3中的剂量以相应生药按10 ml/kg ig,24 h给药3次,于次日给药1次。末次给药后45 min,每鼠ip 0.7%冰醋酸水溶液0.2 ml/只,5 min后开始观察小鼠在10 min内的扭体次数。结果见表3。AE-A，AE-L大剂量和小剂量均具有明显减少扭体次数作用，两者作用强度无明显差异。表3 对醋酸致小鼠扭体反应的影响(略)
2.3 急性毒性实验取小鼠60只, 18～22 g,随机分为两组，每组30只, 雌雄各半,分别用AE-A，AE-L以2 g/kg按0.2 ml/10 g ig给药 (相当于毛郁金及姜黄干燥原生药量58.8 g/kg和62.5 g/kg) ，24h给药3次, 给药后观察7d,动物全部存活。但在第2天,部分动物出现活动减少、耸毛、食量减少等不良反应，第3天开始逐渐恢复正常。第8天全部小鼠解剖肉眼检查，未见各内脏器官的明显异常改变。
以AE-A和AE-L 分别ip给药，采用改进寇氏（Krber）法，分5个剂量组，组间剂量公比0.8，每组10只小鼠，雌雄各半，给药1次后观察7 d。测得：毛郁金LD50为（54.24±6.27）g/kg（P＝0.95），(相当于AE-A 1.84 g/kg)； 姜黄LD50为（56.88±6.51）g/kg（P＝0.95），(相当于AE-L 1.82 g/kg)。动物死亡大多发生在给药后24 h以内，部分动物出现扭体、步态不稳、兴奋等症状，死亡前有呼吸困难及惊厥症状。死亡小鼠和第8天余下的全部小鼠均解剖肉眼检查，未见各内脏器官的明显异常改变。
3 讨论
毛郁金的根茎为地区习用中药材，在抗炎、镇痛作用及急性毒性方面，本实验结果与黔产毛郁金的地方习惯用法基本相符。其它方面的作用尚待进一步研究。
以AE-L作对照，AE-A表现明显的抗炎作用，对急性及慢性炎症模型均有明显的对抗作用，从炎症抑制率上看，毛郁金较姜黄作用稍强。另外，结果显示AE-A与AE-L一样，ig给药4d对幼龄小鼠免疫器官没有显著的抑制作用，但在本实验条件下，给药组免疫器官指数的均数比NS组的偏小，值得注意，长期给药是否会明显影响幼龄小鼠的免疫器官指数，有待进一步研究。AE-A还表现出明显的镇痛作用，毛郁金的作用强度与姜黄相似。
急性毒性实验显示AE-A与AE-L的急性毒性相似。AE-A与AE-L以ig给药，小鼠能耐受的给药量为3×2 g·kg-1·(24 h)〔相当于毛郁金干燥原生药 3×58.8 g·kg-1·(24 h)、姜黄干燥原生药 3×62.5 g·kg·-1(24 h)〕，而人的临床口服用药量为毛郁金或姜黄干燥原生药3～9 g/d［1，3］，小鼠平均体重以20 g计，人平均体重以50 kg计，计算出小鼠ig的安全给药量相当于人临床口服用药量的900倍以上，说明AE-A短期口服给药安全范围很大，且结果提示AE-A与AE-L相似。ip给药，测得AE-A与AE-L的LD50相似。
【参考文献】
［1］国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：238.
［2］贵州省中药资源普查办公室，贵州省中药研究所. 贵州中药资源［M］.北京:中国医药科技出版社,1992：242，903.
［3］贵州省卫生厅. 贵州省中药材标准［S］.贵阳：贵州人民出版社，1988：105.
［4］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海:上海科技出版社，1991：300,350,353,495. |
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发表于 2014-8-16 23:42:57
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