茅苍术挥发油提取方法的比较研究

amy54321 · 发表于 2014-8-16 23:40:23

      作者：杨凌，欧阳臻，韩丽，宿树兰，王鸣

【摘要】  目的优选茅苍术挥发油的提取方法。方法采用水蒸气蒸馏法、超声提取法、索氏抽提法和超临界CO2萃取法，以挥发油得率及苍术素的含量为考察指标，采用气相色谱法测定苍术素的含量，对4种提取方法进行比较研究。结果超临界CO2萃取挥发油得率为10.61%，挥发油中苍术素的含量为28.62%，均高于其它3种提取方法。结论超临界CO2萃取法挥发油得率和油中苍术素的含量最高，优于其它3种方法，适用于茅苍术挥发油的提取。

【关键词】  茅苍术；挥发油；提取方法；超临界CO2萃取法

　　Abstract：ObjectiveTo study different methods of essential oil extraction from Atractylodes lancea (Thunb.) DC.and determine the optimum extraction method.MethodsSteam distillation 、Ultrasonic extraction、Soxhlet extraction and Superfluid extraction CO2 were compared with the extraction yield and content of Atrctylodin in the essential oil from Atractylodes lancea (Thunb.) DC as indexes.ResultsYield of SFE-CO2 was 10.61% ,and content of Atrctylodin of SFE-CO2 was 28.62%，which was higher than the other three methods.ConclusionThrough comparing four kinds of methods , we can see SFE-CO2 is better than the other three methods. It has the best quality about extraction yield and content of Atrctylodin in the essential oil, it is suit for extracting the essential oil from Atractylodes lancea (Thunb.) DC.

　　Key words:Atractylodes lancea (Thunb.) DC.；  Essential oil；  Abstraction； SFECO2

苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea（Thunb.）DC.或北苍术Atractylodes chinensis（DC.）Koides的干燥根茎［1］，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目的功能，用于脘腹胀满、泄泻、水肿、脚气痿痹、风湿痹痛、风寒感冒、夜盲等。茅苍术因产于江苏茅山而得名，江苏茅山为历史道地药材产区。国内外对茅苍术成分的研究主要集中在挥发油方面，挥发油中的主要有效成分为苍术素、苍术酮、β桉叶醇等。现代药理表明茅苍术挥发油具有抗胃溃疡［2］、抗病毒［3］、以及抗缺氧［3］和中枢神经抑制［4］等作用。

目前国内外对茅苍术挥发油的化学成分和药理作用研究的比较深入，但对其提取方法研究的较少。文献报道的提取方法多以传统的提取方法如水蒸气蒸馏法、溶剂浸取法等为主，本实验将水蒸气蒸馏法、索氏、超声提取法和超临界CO2萃取法进行比较，以挥发油得率和苍术素含量为考察指标，并采用GC法［5］测定苍术素的含量，以期得到一种提取效率高，挥发油质量好的提取方法，为茅苍术道地药材质量评价的进一步研究提供实验依据。

　　1  材料与仪器

　　1.1  材料与试剂

　　茅苍术药材购于江苏省句容市茅山地区，经本校生药室欧阳臻副教授鉴定为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea（Thunb.）DC.的干燥根茎。苍术素对照品(自制，GC峰面积归一化法测定纯度大于98%)、石油醚、醋酸乙酯等为分析纯。

　　1.2 仪器Agilent4890N气相色谱仪, N2000双通道色谱工作站（浙江大学智能信息工程研究所）；SFECO2萃取实验台(江苏大学、江苏海安应用石油设备制造厂联合研制)；挥发油测定器；索氏提取器；B5200S型超声波清洗器(上海必能信超声仪器有限公司)；Startorius电子天平。

　　2  方法与结果

　　2.1  水蒸气蒸馏法（SD）取茅苍术粗粉10 g，过65目筛，精密称定，按《中国药典》（2005年版附录XD）挥发油测定甲法提取挥发油，用无水Na2SO4脱水，重复以上实验3次，计算挥发油平均得率。

　　2.2  超声提取法(SC)取茅苍术粗粉10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入石油醚250 ml，超声(功率160 W，频率50kHz）3次，6 h/次，合并提取液，抽滤，回收石油醚后得红棕色油状物，重复以上实验3次，计算平均提取率。

　　2.3  索氏抽提(SX)取茅苍术粗粉10 g，精密称定，置索氏提取器中，石油醚提取至提取液近无色，回收石油醚后得红棕色油状物，重复以上实验3次，计算平均提取率。

　　2.4  超临界二氧化碳萃取法（SFECO2）取茅苍术粗粉10 g，精密称定，置SFECO2萃取釜中，萃取条件为：压力20 MPa，萃取温度45℃，CO2流量3 L/h，解析釜温度45℃，萃取时间3 h。收集萃取后的红棕色油状物，重复以上实验3次，计算平均提取率。

　　2.5  苍术素含量测定

　　2.5.1  供试品溶液的制备取以上4种方法所得茅苍术挥发油各200 mg，精密称定，置10 ml容量瓶中以醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液。　2.5.2  内标液的配制精密称取萘100.00 mg，加醋酸乙酯溶解并定容至10 ml，配成10.00 mg/ml的内标液。

　　2.5.3  测定条件
　　HP1弹性石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）， FID检测器，载气氮气；起始温度40℃，保留5 min；柱前压150kPa；分流比40∶1，气化室温度250℃，检测器温度250℃；进样量1 μl。色谱图见图1～3。

　　2.5.4  标准曲线绘制取苍术素对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯溶解配成1.000，3.000，5.000，7.000，9.000 mg/ml的溶液，并分别加入10 μl的内标液萘，以苍术素和萘的峰面积比为纵坐标，苍术素的浓度为横坐标，计算回归方程得Y=0.685 6X-0.376 4,r=0.999 1，苍术素在1.000～9.000 mg/ml范围内呈良好线性关系。

　　2.5.5  精密度实验吸取苍术素对照品溶液1μl，连续进样测定6次，以峰面积值计算，RSD为2.04%。

　　2.5.6 重现性实验分别吸取2.5.1项下供试品溶液各1μl，各供试品溶液连续进样测定6次，以苍术素峰面积值计算，各供试品溶液RSD分别为1.35%，1.13%，2.25%，1.84%。

　　2.5.7 稳定性实验分别吸取2.5.1项下供试品溶液各1 μl，各供试品溶液每隔1 h测定1次，共测定6次，RSD分别为0.46%，0.75%，0.92%，0.95%，表明各供试品溶液在6 h内稳定。

　　2.5.8  加样回收率实验取已知苍术素含量的各供试品溶液，分别精密加入一定量的苍术素对照品，依据2.5.3项下GC条件进行测定。结果见表1。表1  4种供试品溶液中苍术素加样回收率测定（略）

　　2.5.9  挥发油中苍术素含量测定取上述各供试品溶液，依2.5.3项下条件进行测定。结果见表2。表2  不同提取方法挥发油得率及油中苍术素的含量（略）

　　3  小结

SFE-CO2萃取的挥发油得率和挥发油中苍术素含量最高，索氏提取次之，水蒸气蒸馏的挥发油得率最低，超声提取的苍术素含量最低。
SFE-CO2萃取时间短，效率较高，在低温和密闭萃取釜中进行，对保持挥发油的稳定具有一定的优势，总体评价优于其它的提取方法，适用于茅苍术挥发油的提取。

　　4  讨论

　　4.1  经文献报道和本文的研究，茅苍术中挥发油为其主要有效成分之一，挥发油中苍术素的含量相对较高，且具有独特的药理作用［2～4］，故选其为含量测定的指标性成分。

　　4.2  茅苍术挥发油具有光敏性和不稳定的特点，见光和高温易分解，传统的提取方法如水蒸气蒸馏等需要高温且在日光中暴露的时间较长，不利于挥发油的提取；而超临界CO2萃取法可避免以上缺点，在较低温度和密闭的环境中进行提取，且以CO2为溶剂避免了溶剂残留，较传统的提取方法有更大的优势，尤其适用于茅苍术等含挥发性成分较多的药材。

【参考文献】
  　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：111.

　　［2］聂淑琴，李兰芳，杨庆，等. 5种产地苍术提取物主要药理作用比较研究［J］.中国中医药信息杂志，2001，8(2)：27.

　　［3］李育浩，梁颂名，山原条二，等. 苍术的抗缺氧作用及其活性成分［J］.中药材，1991，14(6)：41

　　［4］王玉良.苍术、白术的药理理学研究［J］.日本医学介绍，1984，12(5)∶30.

　　［5］Osami Takeda，Eiji Miki，Susumu Terabayashi，et al.A comparative Study on Essential Oil Components of　Wild and Cultivated Atractylodes lancea and A.chinensis［J］.Plant medica,1996,62（5）：444.

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