生脉制剂含量测定的研究进展

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【摘要】  概述国内有关生脉制剂的含量测定研究进展，为提高和完善生脉制剂的质量控制体系提供依据，同时便于药学工作者根据各种实际情况加以选择应用。

【关键词】  生脉；含量测定；研究进展


    “生脉散”之方名首载于金元时期张元素所著《医学启源》(1186年)，定型于《内外伤辨惑论》，完善于《医方考》［1，2］。《医学启源》中记载，该方由人参、麦冬、北五味子组成。主治热伤元气、阴液亏耗的气阴两虚症。在现代科学技术的推动下，生脉散也研制为一些现代新剂型，其组方也发生了改变。例如，由红参替代人参，和麦冬、五味子组成生脉注射液［3］；去掉五味子，仅以人参和麦冬组成的参麦注射液等［4］。各种剂型的涌现对生脉制剂的质量有了更高的要求，而生脉饮在药典中并无含量测定项［3，5］。因此笔者对近年的相关文献进行了追踪、整理和分类，希望有助于生脉制剂的研究与质量标准控制，特别是含量测定的提高和完善。现将生脉制剂的含量测定研究情况综述如下。

　　1  高效液相色谱法

　　1.1  人参皂苷类李杰等［6］采用HPLC法测定了生脉饮中人参皂苷Rb1、Rb2、Re的含量。方法：采用LC-4A高效液相色谱仪，YWG-C18(5 μm，4.6 mm×250 mm)色谱柱，流动相：甲醇-水(72∶28)，流速0.8 ml·min-1，柱温47℃。

　　1.2  人参二醇和人参三醇李章万等［7］考虑人参皂苷及其水解产物均无特征紫外吸收，常规方法在灵敏度或分离度等方面都不尽人意，采用3，5-二硝基苯甲酰氯为衍生化剂，反相HPLC法对生脉注射液中人参二醇和人参三醇含量测定方法进行了研究。用3，5-二硝基苯甲酰氯(3，5-DNB)为衍生化剂、高效液相色谱法测定了红参和生脉注射液中人参二醇及人参三醇的含量。以C18硅烷键合相为填料，甲醇-水(95∶5)为流动相，检测波长230 nm，进行反相高效液相色谱法测定。

　　1.3  五味子醇甲欧金梅，韦向红等［8,9］采用高效液相色谱法测定生脉饮中五味子醇甲的含量，色谱柱为十八烷基键和硅胶柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），流动相为甲醇-水(13∶7)，检测波长250 nm，柱温30℃（或室温），流速1.0（或0.6）ml·min-1。

    刘钰等［10］建立了高效液相色谱法测定生脉颗粒中五味子醇甲含量的方法：选用LC-10AT高效液相色谱仪，Hypersilbds C18（5 μm，4.6 mm×250 mm）色谱柱，流动相为甲醇-水(62∶38)，检测波长为254 nm。

    陈平等［11］建立了屏风生脉胶囊中五味子醇甲的含量测定方法。色谱柱Inertsil ODS-3（5 μm，4.6 mm×150 mm），流动相为乙腈-水(45∶55)，检测波长250 nm，柱温25℃，流速1.0 ml·min-1。
     
　　吴晓凤等［12］测定了生脉饮中五味子醇甲的含量。方法：样品减压蒸干，用乙酸乙酯超声提取，提取液过滤，蒸干，残渣用甲醇溶解后，经高效液相色谱仪测定；PHENOMENEX C18色谱柱(5 μm，4.6 mm×250 mm)，流动相乙腈-甲醇-水(15∶15∶10)，柱温30℃，流速1.0 ml·min-1，检测波长254 nm。

　　1.4  五味子甲素和五味子乙素杨滋渊等［13］采用HPLC法测定了生脉胶囊中五味子甲素的含量。色谱柱为Phenomenex C18柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），流动相为甲醇-水(80∶20)，检测波长252 nm。

    杨琼芳等［14］采用HPLC法测定了生脉袋泡茶中五味子甲素的含量。色谱柱为Shim Pack-ODS C18柱（5 μm，4.6 mm×150 mm），流动相为甲醇-水(76∶24)，检测波长254 nm。柱温25℃，流速1.0 ml·min-1。
    张新奎等［15］采用HPLC法测定了生脉饮中五味子乙素的含量。色谱柱为十八烷基键和硅胶柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），流动相为甲醇-水(13∶7)，检测波长254 nm，柱温室温，流速1.0 ml·min-1。

　　1.5  综合类夏晶等［16］

　　建立了同时测定生脉注射液(红参、麦冬、五味子)中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和五味子醇甲4种成分含量的方法。方法：Waters510高效液相色谱仪，色谱柱Waters symmetryshield  TMRP18(5 μm，4.6 mm×250 mm)，乙腈-水梯度洗脱，流速1.0 ml·min-1，检测波长为203 nm。

    胡晓斌等［17］采用HPLC测定生脉胶囊中五味子甲素、乙素的含量,以控制成品的质量。方法：采用Shim-packODS色谱柱，柱温25℃，甲醇-水(78∶28)为流动相，流速1.0 ml·min-1，检测波长254 nm；并建立了生脉胶囊中人参皂苷Rg1、Re的HPLC含量测定方法：样品超声提取，采用LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，Shim-packODS色谱柱，柱温40℃，乙腈-0.05%磷酸（22∶78）为流动相，流速1.2 ml·min-1，检测波长203 nm［18］。

    何海冰等［19］采用ODS C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm)，流动相为乙腈-水（88∶12），流速1.0 ml·min-1，检测波长204 nm，柱温30℃，对生脉粉针剂中的薯蓣皂苷元进行含量测定。同时对五味子醇甲的HPLC含量测定方法进行了研究［20］。采用HiQSil C18柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），流动相为乙腈-水（50∶50），流速1.0 ml·min-1，检测波长254 nm，柱温25℃。

　　2  分光光度法

    何海冰等［20］ 采用紫外分光光度法对生脉粉针剂中总木脂素含量进行了测定。检测波长254nm。

    张梅等［21］将样品经大孔树脂净化、显色剂的选择性显色后，使用UV-210A型紫外可见分光光度计，采用正交函数分光光度法使得麦冬和五味子对人参总皂苷测定的影响基本消除，测定了生脉注射液中人参总皂苷含量。　3  薄层扫描法

    彭勃等［22］认为人参为生脉饮口服液中君药，故应以人参为定量对象，但因复方制剂生脉饮在制成水剂时其内部成分发生了变化，人参皂苷Rb1、Rb2、Rf、Rd、Re均已消失，而Rg1、Rh1的含量比单昧人参中明显增高，在生脉饮口服液中Rg1、Rg2、Rh1、Rf为人参皂苷中的主要皂苷，所以该实验采用薄层扫描法测定生脉饮口服液中人参苷Rg2的含量，可以有效地控制产品质量。方法：CS-910型薄层扫描仪，薄层板为0.3％CMC-Na的硅胶G板(20 cm×20 cm×0.4 mm)105℃活化30 min，展开剂为氯仿-甲醇-水(65∶3∶10)10℃以下放置和下层溶液为好，人参皂苷Rg2为对照品，λs=525 nm，λR=700 nm。

　　4  小结

    综上所述，生脉制剂的含量测定主要采用高效液相色谱法，指标包括人参（红参或党参）中的皂苷类成分；五味子中的五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素；麦冬中的薯蓣皂苷元等，均取得较好效果并能有效控制制剂质量，而对大类成分研究较少。鉴于此，笔者认为《中国药典》生脉饮制剂可以考虑增加含量测定项以更有效地控制制剂质量。目前，国内外正积极开发研制其复合物、新制剂，通过提高和完善质量控制体系，特别是含量测定方法的改进，对增强疗效，扩大应用范围具有重要意义。

【参考文献】
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　　［2］李东垣.内外伤辨惑论［M］.北京：人民卫生出版社，1959：16.

　　［3］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：424.

　　［4］张群智.古方生脉散现代应用探讨［J］.中成药，2001，23(4)：286.

　　［5］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：436.

　　［6］李 杰，徐 兴，韩振明.HPLC法测定生脉饮中的人参皂苷［J］.山东医药工业，2002，21(3)：19.

　　［7］李章万,徐秀荣,冯春琼,等.高效液相色谱衍生化法测定红参及生脉注射液中人参二醇和人参三醇的含量［J］.华西药学杂志，1999，14(4)：271.

　　［8］欧金梅，罗捷华.HPLC测定生脉饮中五味子醇甲的含量［J］.安徽中医学院学报，2006，25(1)：33.

　　［9］韦向红，唐敏玲. HPLC法测定生脉饮(党参方)中五味子醇甲的含量［J］.广西中医药，2005，28(4)：57.

　　［10］刘 钰，丁丽萍，李德公.高效液相色谱法测定生脉颗粒中五味子醇甲的含量［J］.药品检测，2003，12(8)：39.

　　［11］陈 平，蔡雄辉，张继良，等. 高效液相色谱法测定屏风生脉胶囊中五味子醇甲的含量［J］.中国医院药学杂志，2004，24(8)：478.

　　［12］吴晓凤，陈 虹，赵志茹.HPLC法测定生脉饮中五味子醇甲的含量［J］.中国中药杂志，2003，28(1):39.

　　［13］杨滋渊，黄萍，衷红梅.反相高效液相色谱法测定生脉胶囊中五味子甲素的含量［J］.西北药学杂志，2006，21(1)：6.

　　［14］杨琼芳，王贤英.高效液相色谱法测定生脉袋泡茶中五味子甲素含量［J］.中国药业，2006，15(1)：42.

　　［15］张新奎，王育红. HPLC法测定生脉饮中五味子乙素的含量［J］.中医药学报，2005，33(4)：15.

　　［16］夏 晶，王钢力，季 申，等.HPLC测定生脉注射液中4种成分的含量［J］.中成药，2006，28(1)：27.
　
　　［17］胡晓斌，李 颖，吴苏澄，等.HPLC测定生脉胶囊中五味子甲素和乙素的含量［J］.华西药学杂志，2003，18(2)：141.

　　［18］胡晓斌，李 颖，吴苏澄，等.生脉胶囊中人参皂苷Rg1、Re的HPLC测定［J］.中药新药与临床药理，2003，14(1)：49.

　　［19］何海冰，唐 星，于叶淼.RP-HPLC测定生脉粉针剂中薯蓣皂苷元的含量［J］.中成药，2005，27(6)：664.

　　［20］何海冰，唐 星，于叶淼.生脉粉针剂中五味子醇甲和总木脂素的含量测定［J］.沈阳药科大学学报，2005，22(4)：282.

　　［21］张 梅，陈海红，张 艺，等.正交函数分光光度法测定生脉注射液中人参总皂苷含量［J］.中国药学杂志，1999，34(2)：98.

　　［22］彭 勃，季玉荣，蔡礼贵.薄层层析测定生脉饮口服液中人参皂苷Rg2含量［J］.河南中医药学刊，2001，16(3)：29.