黄芪对大鼠酒精性肝病肝组织ICAM-1表达的影响

amy54321 · 发表于 2014-8-16 22:57:52

【摘要】  目的探讨黄芪对大鼠酒精性肝病肝组织ICAM1的影响。方法将36只大鼠随机分为3组（每组12只）：正常对照组（简称对照组）、酒精性肝病模型组（简称模型组）、酒精性肝病黄芪治疗组（简称治疗组）。观察各组肝组织ICAM1的表达及肝组织形态学改变。结果酒精性肝病模型组肝组织ICAM-1的表达明显增强，与正常对照组有显著性差异（P＜0.01）；酒精性肝病黄芪治疗组与酒精性肝病模型组比较肝组织ICAM1的表达明显减弱（P＜0.01），肝组织损害减轻（P＜0.01）。结论黄芪对酒精性肝病有防治作用，其机理可能与其抑制肝细胞中ICAM1的的表达有关。
　　

【关键词】  酒精性肝病；细胞间黏附分子-1；黄芪

　　The Effect of Radis Astragali on the Expression Level of Intercellular Adhesion Molecule-1(ICAM-1) in Liver with Alcoholic Liver Disease in Rats

　Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of Radis Astragali on the expression of intercellular adhesion molecule1(ICAM1) in liver with alcoholic liver disease in rats.Methods36 cases of rats were randomly into three groups:control group ,alcoholic liver disease group ,alcoholic liver disease treatment group,12 cases in each.The morphological changes and ICAM-1 expression level in liver were observed.ResultsThe expression level of ICAM1 in alcoholic liver disease group was higher than that in control group(P＜0.01)，the structure of liver tissue was impaired(P＜0.01).The expression level of ICAM1 in alcoholic liver disease treatment group was lower than that in alcoholic liver disease group(P＜0.01),the structure injury in the liver tissue was alleviated (P＜0.01).ConclusionRadis Astragali has satisfactory effect on experimental alcoholic liver disease,the mechanism may be corelated with its inhibition on ICAM1 in liver tissue.

　　Key words：Alcoholic liver disease;  Intercellular adhesion molecule1;  Radis Astragali

酒精性肝病（Alcoholic liver disease ,ALD）是指长期饮酒引起的酒精性肝损伤，由于发病率呈不断上升趋势，因此我们对酒精性肝病的发病机制及其防治的研究十分重视。近来研究表明，组织细胞间黏附分子1（Intercellurlar adhesion molecule1,ICAM1）与酒精肝病关系密切［1，2］，是引起肝损伤的一个重要因素。本研究采用大鼠酒精性肝病动物模型，观察黄芪对大鼠酒精性肝组织细胞间黏附分子-1表达的影响，为临床上防治酒精性肝病提供理论依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  模型制备及动物分组选用健康雄性Wistar 大鼠36只，体重250 g，由咸宁学院动物室提供。随机分为3组，每组12只。正常对照组、酒精性肝病模型组、酒精性肝病黄芪治疗组。采用乙醇浓度、剂量逐渐递增法复制酒精性肝病模型。实验动物正常喂养一周后，除正常对照其余各组均给予40%的乙醇6 g·kg-1·d-1分两次灌胃，以后每2周灌胃乙醇量与浓度逐渐递增，第10周乙醇浓度为60%，灌胃量为10 g·kg-1·d-1，连续灌胃12周成模。对照组给予相同剂量的生理盐水，每日灌胃两次，共12周。酒精性肝病黄芪治疗组于首次乙醇灌胃当日经口灌注黄芪水提液，（每毫升含生药1 g）1 ml/只，1次/d,方法及时间同黄芪组。于实验结束时处死动物，肝脏左、右叶各取两块组织标本，10%中性福尔马林固定，常规石蜡切片，进行常规病理检查及ICAM1免疫组化研究。

　　1.2  肝组织ICAM1蛋白表达的测定免疫组织化学（SP）方法检测肝组织石蜡切片中ICAM-1的表达，操作按说明书进行（ICAM-1单克隆抗体购于武汉博士德公司）。切片随机编号，由两位观察者进行独立阅片。染色结果判断标准：强阳性（+++）表示细膜明显染色（深棕黄），且阳性细胞占75%以上；阳性（++）表示细胞膜中度染色（黄色），且阳性细胞占50%～75%；弱阳性（+）表示细胞膜轻度染色（浅黄色），且阳性细胞占10%～50%；阴性（-）表示细胞膜无染色或阳性细胞＜10%。

　1.3  肝组织形态学观察肝组织HE染色后，光镜下观察并摄像。电镜标本常规制样，在日立H-600透视电镜下观察并摄像。

　　1.4  统计学分析组间采用t检验。　　2  结果

　　2.1  肝组织ICAM1表达的变化正常对照组肝组织ICAM-1仅少量表达；与正常对照组比较，酒精性肝病模型组、酒精性肝病黄芪治疗组肝组织ICAM-1表达均增强（P＜0.01）。酒精性肝病黄芪治疗组肝组织ICAM-1表达弱于酒精肝病模型组，但强于正常对照组（P＜0.01）。结果见表1。表1  3组大鼠肝组织ICAM-1表达的比较（略）

　　2.2  肝组织形态学观察结果正常对照组大鼠肝小叶结构正常，肝细胞条索规则有序，偶见脂肪滴，未见炎症及坏死。酒精性肝病模型组肝小叶结构紊乱，肝细胞广泛脂肪变性，肝小叶中央静脉区可见肝细胞点状坏死，肝窦及汇管区大量炎性细胞浸润。酒精性肝病黄芪治疗组肝小叶结构正常，未见明显肝细胞脂肪变性和炎性细胞浸润。

　　3  讨论

长期过量的酒精摄入会导致不同程度的肝损伤，并逐渐向肝纤维化、肝硬化发展。酒精性肝损伤的发生除乙醇及其代谢产物对肝脏的直接毒性外，氧应激、细胞因子以及其介导细胞凋亡等在发病机制中亦起着重要作用，但酒精性肝损伤的确切发病机制至今未完全明了。研究表明，ICAM1与酒精性肝病关系密切，SantosPerez等［3］认为ICAM及其配体LFA1相结合后引起肝组织炎性浸润，进而导致肝细胞的损伤，Bautista［4］对离体肝细胞培养，证实酒精可使ICAM1表达增加。本文结果提示在正常肝组织ICAM1仅少量表达，酒精性肝病模型肝组织ICAM1表达增强。这与文献报道相一致。黄芪是扶正补气中药，具有提高免疫、抗自由基和膜脂质过氧化、延缓肝纤维化的作用，且成分相对稳定，已广泛用于临床。本研究结果显示，酒精性肝病黄芪治疗肝组织ICAM1表达弱于酒精性肝病模型组，肝组织结构损害减轻，提示黄芪抑制酒精性肝病肝组织ICAM1的表达，从而减轻了肝组织的损害。这可能是黄芪抑制酒精性肝脏有保护作用的主要机制，其具体机制有待进一步研究。

【参考文献】
  　　［1］周慧敏，张庆富，王炳元，等.酒精性肝病肝细胞ICAM1表达的实验研究［J］.中国微循环，2006，10（3）：193.

　　［2］Sougioultzis S,Dalakas E,Hayes PC,et al.Alcoholic hepatitis:from pathognesis to treatment［J］.Curr Med Res Opin,2005 Sep,21(9)：1337.

　　［3］SantosPerez JL,Diez-Ruiz A,Luna -Casado,et al.T-cell activation ,expression of adhesion molecules and response to ethanol in alcoholic cirrhosis ［J］.Immunol Lett,1996 May,50(3)：179.

　　［4］Bautista AP.Chronic alcohol intoxication induces hepatic injury through enhanced macrophage inflammatory protein-2 production and intercellular adhesion molecule1 expression in the liver［J］.Hepatology ,1997,25(2)：335.

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[药学] 黄芪对大鼠酒精性肝病肝组织ICAM-1表达的影响