超临界二氧化碳萃取气相色谱—质谱联用分析东当归挥发油化学成分

amy54321 · 发表于 2014-8-16 22:53:45

【摘要】  目的对吉林省延边地区产东当归的挥发油化学成分进行分析。方法采用超临界CO2萃取技术对东当归中挥发油成分进行提取，用GC-MS联用技术分离鉴定其化学组成，计算其相对百分含量。结果超临界CO2萃取物为黄棕色油状物，得率为0.9%，用GC-MS联用技术从中鉴定出亚油酸乙酯、5，5-二甲基-双环（6，3，0）-1，7-十一烯-3-酮等30种成分，占挥发油总含量65.66%；萃取物经硅胶柱色谱分离纯化，从中鉴定出十八酸乙酯等11种成分，占总含量的85.1%。结论首次从东当归挥发油当中分离鉴定出5，5-二甲基-双环（6，3，0）-1，7-十一二烯-3-酮等10种化学成分，超临界CO2萃取与传统方法提取的东当归中挥发油化学成分有显著不同。

【关键词】  东当归；超临界二氧化碳萃取；气相色谱-质谱；挥发油

　　Abstract：ObjectiveTo study the chemical components of the essential oil from the Angelica acutiloba Kitag of Yanbian region in Jilin. Methods The essential oil of the Angelica acutiloba Kitag was extracted by SFE-CO2 and by the silica gel column separately, the GC-MS method was used for the analysis of extracts.Results The SFE-CO2 extracted the yellow brown oil, the rate was 0.9%. 30 components were identified which represented 65.66% of the total essential oil includding 9.12-Octadecadienoic acid, ethyl ester and ect. 11 components were  identified which represented 85.1% of the total essential oil by the silica gel column separately.Conclusion 10 components were identified which included Bicyclo (6,3,0) undeca-dien-3-one, 5,5-dimethyl ect. of the essential oil from Angelica acutiloba Kitag were analyzed for the first time. The SFE-CO2 extracted the volatile oil chemistry composition in the Angelica acutiloba Kitag that withdraws with traditional method have already shown the marked difference.

　　Key words：Angelica acutiloba Kitag;  SFE-CO2;  GC-MS;  Essential oil

东当归Angelica acutiloba kitag，别名日本当归、大和当归、延边当归。早在20世纪70年代，东当归在中国吉林延边地区引种成功，作为朝鲜族的民族药材被广泛应用于民间［1］。主要功能为清肝利胆，除湿热，健胃。用于肝炎、胆囊炎、食欲不振［2］。日本的大和当归，即为延边地区引种的朝鲜族常用的——东当归，在《日本药局方》规定：大和当归具有补血调经、活血止痛、润肠通便的作用，与中国当归的功能主治相一致［1］。其广泛分布于吉林省延边地区，栽培于排水良好而湿润的沙质土壤。四川省从1991年开始引种栽培东当归［3］，目前在其它地区尚未有栽培。近年来有以东当归充当当归使用的现象［4，5］，为了进一步明确东当归的化学成分，本文运用超临界CO2萃取、GCMS和硅胶柱色谱技术首次对吉林省延边地区东当归挥发油的化学成分进行了研究，为以后充分利用东当归资源提供依据。

　　1  材料

　　1.1  药材

　　来源药材采购于吉林省延边地区龙井市，经本院生药学教研部刘永镇教授鉴定为东当归Angelica acutiloba (Sieb.et Zucc) Kigusticum acutilobu. Siebet Zuco的根。

　　1.2  仪器

　　QP2010型GCMS联用仪（日本岛津）。超临界萃取仪TCSFE505120S（沈阳天诚超临界萃取有限公司）。

　　1.3  色谱条件DB-5MS柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），载气为He，气化室温度：280℃；程序升温：色谱柱初始温度70℃，保持2 min，以15℃/min升温至180℃，保持1 min，再以20℃/min升温至280℃，保持20 min。

　　1.4  质谱条件电力方式EI；电离电压70 eV；GCMS界面温度280℃，扫描范围45～600 amu，进样量2 μl，所解析分辨质谱在NIST标准谱库进行检索。

　　2  方法

　　2.1  挥发油的提取超临界CO2萃取：取干燥2 kg东当归粉碎成粒度40目的细粉，萃取温度41℃、萃取压力30 MPa，萃取时间2 h，CO2流量20 L/h，分离釜Ⅰ压力7 MPa，分离釜Ⅰ温度46℃；分离釜Ⅱ压力6 MPa，分离釜Ⅱ温度40℃，得具有芳香气味的黄棕色油状物18 g，收率0.9%。　　2.2  挥发油的纯化将超临界CO2萃取所得挥发油16 g，上硅胶柱（200～300目），用石油醚：醋酸乙酯进行梯度洗脱，在石油醚：醋酸乙酯（100∶1）洗脱部位中得到淡黄色油状物Ⅰ，在（80∶1）洗脱部位中得乳白色油状物Ⅱ，在（60∶1）洗脱部位中得黄棕色油状物Ⅲ，在（50∶1）洗脱部位中得淡黄色油状物Ⅳ和黄色油状物Ⅴ，分别精取各油状物0.1 g，利用GC-MS鉴定其化学组分。

　　2.3  样品的测定

　　2.3.1  超临界CO2萃取所得总挥发油利用GCMS联用仪分析，得到的图谱与标准图谱对照，鉴定出30种化学成分，根据数据处理系统得出的样品色谱峰面积计算出各成分的相对含量。总离子流图见图1，结果见表1。表1  超临界CO2萃取东当归的挥发油成分GCMS分析结果（略）

　　2.3.2  硅胶柱分离得到的挥发油利用GCMS联用仪分析，得到的图谱与标准图谱对照，鉴定出11种化学成分，根据数据处理系统得出样品各色谱峰面积计算出各成分的相对含量。总离子流图见图2。结果见表2。表2  超临界CO2萃取硅胶柱纯化的东当归挥发油成分GC-MS分析结果（略）

　　3  讨论

　　3.1  本文首次利用超临界CO2萃取技术，对吉林省延边地区东当归挥发油成分进行了研究，挥发油得率有较大提高（0.9%），而利用常规水蒸气蒸馏法提取东当归挥发油得率仅为0.04%［1，3］；从超临界CO2萃取得到的东当归挥发油成分和经硅胶纯化后得到的挥发油GC-MS分析结果来看，其主要成分为醇、酮、酯类化合物，亦有烷烃类化合物，其主要成分以业油酸乙酯、棕榈酸乙酯类化合物为主，杜蕾蕾等［3］曾对四川引种栽培东当归挥发油成分采用GC-MS联用法进行了分析，含量最高的藁本内酯（ligustilide），本实验未检测出蒿苯内酯的成分，这可能与药材产地不同、生态环境变迁对植物体内的积累代谢及化合物形成与转化有不同程度影响有关。

　　3.2  为了规范药材市场，使人们能够安全合理使用当归和东当归，有必要对东当归的化学成分和药理作用进一步深入研究，为今后东当归作为正式药材纳入《中国药典》提供科学依据。

【参考文献】
  　　［1］杨连菊，钟风林，胡世林，等.当归与日本当归挥发油中化学组分的比较［J］.中草药，2004，35（10）：1093.

　　［2］崔松男.朝药志［M］.延吉：延边人民出版社，1995：34.

　　［3］杜蕾蕾，王晓静，蔡传真，等.四川栽培东当归挥发油成分分析［J］.中药材，2002，25（7）：477.

　　［4］华勇继.当归与东当归的鉴别［J］.中国中药杂志，1990，15（12）：714.

　　［5］李海洲，张红波，许云.当归及其易混品的鉴别［J］.时珍国医国药，2006，17（4）：614.

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