|
|
【关键词】 黄连 小檗碱 微波 提取
Abstract：ObjectiveTo study the application effect on extraction of Berberine from Coptis chinensis by microwave technology.Methods Based on the single factors test and orthogonal test, the effect of different factors on extraction of berberine from Coptis chinensis was studied by microwave technology,and optimize extracting conditions were got.ResultsWhen microwave oven was at high fire with material and solvent ratio 1∶30 for 10 min ,the extracting rate increased 42.2%.ConclusionThe berberine of coptis chinensis is extracted by microwave ,which can save time and enhance extract-efficiency, save organic solvent and reduce the use of energy .
Key words：Coptis chinensis； Berberine(BR)； Microwave； Extract
黄连是一种著名的中药，《神农本草经》列之为上品，具有抑菌、消炎、健胃、降压和抗肿瘤等作用。其中以小檗碱的含量最多，也是最有效的成分之一，其对心血管系统、神经系统和消化系统具有良好的治疗和保健作用，是一种常用的中草药［1］。
微波是近年来逐渐发展起来的一种新的萃取方法，具有省时、高效和经济的优点。无论是萃取速度、萃取效率还是萃取物质量均优于常规工艺，并以其投资少、设备简单、适用范围广、选择性高、重现性好、无污染等特点而受人瞩目［2］。本研究采用微波技术，通过单因素实验、正交实验，研究黄连中小檗碱的最佳提取条件，为黄连药材的充分利用奠定基础。
1 器材
黄连，购自于沈阳东北大药房，经沈阳农业大学生物科学技术学院高级实验师陈贵老师鉴定为味连Coptic chinensis Franch；盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制品检定所。WP700型微波炉 （乐金电子电器有限公司）；722-型光栅分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。
2 方法
2.1 小檗碱标准曲线的制备［3］以盐酸小檗碱标准品为对照，用95 %的乙醇定容于50 ml的容量瓶中，配制成一系列不同浓度梯度的溶液, 用分光光度计在348 nm下测定不同浓度的小檗碱溶液的吸光值。
2.2 传统稀酸浸提法提取黄连中盐酸小檗碱称取2 g黄连粉末于一个大烧杯中，按固液比（1∶30）加入60 ml 0.2 %的H2SO4溶液，泡1 h，过滤。用石灰乳调pH 7～8，静止后抽滤，滤液再用10 %的盐酸调pH 2～3，最后加入滤液体积4 %～5 %的NaCl静止30 min，抽滤。按标准曲线计算出盐酸小檗碱的含量。
2.3 微波条件下单因素实验对提取率的影响［4］先用单因素实验对影响黄连中小檗碱的几个因素微波功率、作用时间、料液比分别进行实验，以确定正交实验的最佳因素水平。
2.4 正交实验设计在单因素基础上，本实验选取3个有代表性且对小檗碱的提取率影响较大的因素作为正交设计的三因素，即功率、作用时间、加水量。选用L9（33）正交表按表1所示的因素水平进行正交实验。
表1 因素水平（略）
2.5 定性实验为了确定用微波协助提取后，小檗碱的结构、性质不发生变化，并且确定提取物中含有小檗碱，设计此步骤。方法是在一块硅胶薄层板上，将小檗碱标准品、无微波提取的小檗碱（用稀硫酸提取的小檗碱）和用微波提取的小檗碱分别点样，干燥后将其放在（氯仿∶甲醇∶冰乙酸=7∶1∶2）的展开剂中展开，观察结果，求出Rf值。
3 结果与分析
3.1 影响微波提取黄连小檗碱的单因素分析
3.1.1 微波功率对黄连中小檗碱提取率的影响 称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按固液比（1∶30）加入60 ml水，立即放入微波炉中，选取微波的功率档位分别为A（解冻）、B（低火）、C（中火）、D（高火）的条件下加热1 min，加热完毕后，过滤。按上法测定小檗碱的粗含量和精确含量。结果见图1。由图1可知，微波炉高火时黄连小檗碱提取量最大。由此表选用低火、中火、高火作为正交实验的水平。 图1 微波功率对黄连中小檗碱提取率的影响（略）
3.1.2 微波作用时间对小檗碱提取率的影响 称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按固液比（1∶30）加入60 ml蒸馏水，立即放入微波炉中，选取微波的高火档分别作用1，3 ，5 ，7 min。处理后按上法分别测定黄连中小檗碱的含量，结果见图2。由图2可知，微波作用7 min时，黄连小檗碱提取量最大。但由于7 min使溶液剧烈沸腾，故选用1，3，5 min作为正交实验的水平。
图2 微波作用时间对小檗碱提取率的影响（略）
3.1.3 料液比对黄连小檗碱提取率的影响 称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按料液比（1∶20，1∶30，1∶40，1∶50）加入蒸馏水，在高火档、作用时间为3 min的条件下加热黄连的水溶液。处理后按上法分别测定黄连中小檗碱的含量。结果见图3。由图3可知，料液比1∶30时黄连小檗碱提取量最大。
图3 料液比对黄连小檗碱提取率的影响（略）
3.2 正交实验结果按表1所示的因素水平进行正交实验。结果见表2。
其中提高率（%）=（微波条件下小檗碱的量-传统条件下小檗碱的量）/传统条件下小檗碱的量×100%。料液比对提取率影响最大，功率次之，加热时间最小。且以A3B2C2为最佳工艺。经计算，用微波提取后，平均提取率提高42.2 %。
表2 正交实验结果（略）
3.3 定性检验结果 经薄层层析后，发现用微波提取的小檗碱、用传统工艺提取的小檗碱和小檗碱标准品Rf值相同。结果见图4。这说明微波对小檗碱的结构没有变化。
图4 薄层层析图（略）
4 讨论
由以上实验分析可知，用微波协助萃取后，提取率明显提高，平均提取率提高约42.2 %，且对小檗碱的结构没有影响，是一种有效的提取方法。
在用微波协助萃取时，由于温度较高，特别是在中高火档，时间3 min以上时，溶液会剧烈沸腾，导致溶液外溢，小檗碱的含量减少，实验数据不准确。遇到以上问题时，可将黄连粗粉装在一个用纱布缝制的小口袋内，这样可避免溶液由于剧烈沸腾而外溢。由于是用纱布制成的，因此对提取率的影响也较小。不会妨碍小檗碱的溶出。
【参考文献】
［1］ 舒 华，向丽华. 黄连药理作用及临床应用［J］.甘肃中医，2004，17（12）：5.
［2］ 张 英，俞卓裕，吴晓琴. 中草药和天然植物有效成分提取新技术-微波协助萃取［J］.中国中药杂志，2004，29（2）：104.
［3］ 薛慧清.分光光度法测定康尔乐洗涤剂中小檗碱类的含量［J］.中国中药杂志，2003，28（6）：571.
［4］ 郭永学，李 楠.山楂叶总黄酮的微波辅助萃取研究［J］.中草药，2005，36（7）：1011.
|
|
|Archiver|手机版|小黑屋|魅优论文范文网
( 琼ICP备10200388号-7 )
发表于 2014-8-19 18:23:36
收藏
转播
支持
反对